前言：主要成分為抗菌劑和激素的獸藥已廣泛用于疾病防治、促進(jìn)生長(zhǎng)和提高飼料轉(zhuǎn)化率。動(dòng)物源性產(chǎn)品中，能夠引發(fā)過敏反應(yīng)和抗生素耐藥性的獸藥殘留已成為消費(fèi)者在購買產(chǎn)品時(shí)關(guān)注的問題。為保護(hù)公共健康，US FDA 于 2015 年 6 月通過獸藥飼料指令頒布了管控抗微生物藥物使用的終規(guī)定1 。歐盟法規(guī)請(qǐng)參見立法提案 2014/0257(COD)2 ，該法規(guī)將廢止并替代指令 2001/82/EC。新法規(guī)旨在達(dá)成影響評(píng)估所確定的目標(biāo)，并解決抗生素耐藥性帶來的公共健康風(fēng)險(xiǎn)問題。在中國，為設(shè)定動(dòng)物源食品中獸藥含量的大限值3 ，農(nóng)業(yè)部發(fā)布了第 235 號(hào)公告3 。根據(jù)分析物和基質(zhì)的不同，實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量要求的范圍為 ppt 至 ppb 級(jí)?；|(zhì)的復(fù)雜性加上不同類別獸藥的特性（如不同 pH 條件下的疏水性和穩(wěn)定性），導(dǎo)致難以在一次運(yùn)行中檢測(cè)多個(gè)類別的分析物。常用標(biāo)準(zhǔn)方法可涵蓋一個(gè)類別或一小組相似類別的獸藥。為有效監(jiān)測(cè)獸藥并保護(hù)公共健康，迫切需要能夠在一次運(yùn)行中檢測(cè)多個(gè)類別的分析物。 Agilent Ultivo 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)十分符合這一要求。Ultivo 專門設(shè)計(jì)用于解決以環(huán)境和食品安全領(lǐng)域?yàn)榇淼某Ｒ?guī)生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)室所面臨的許多挑戰(zhàn)。該系統(tǒng)融入了多項(xiàng)革命性創(chuàng)新，體積遠(yuǎn)小于上一代三重四極桿系統(tǒng)，但性能絲毫不打折扣。雙六極桿設(shè)計(jì)使系統(tǒng)擁有離子傳輸效率。硬件和電子元件方面的提升使極性切換速度更快。此外，Ultivo 減少了用戶對(duì)系統(tǒng)維護(hù)的干預(yù)，使非專業(yè)質(zhì)譜用戶也能夠通過 VacShield 真空盾和可拆卸檢測(cè)器從容應(yīng)對(duì)系統(tǒng)運(yùn)行和維護(hù)。

本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)展示了一種分析篩查方法，能夠?qū)?Ultivo 三重四極桿液質(zhì)系統(tǒng)與 Agilent 1290 Infinity II UHPLC 聯(lián)用，分析豬肉和雞蛋中 27 個(gè)類別的 151 種獸藥。我們還證明了 Agilent EMR-Lipid 樣品前處理試劑盒具有廣泛的應(yīng)用范圍。EMRLipid 能夠有效去除動(dòng)物源基質(zhì)中的高脂成分，并提供優(yōu)異的獸藥回收率

實(shí)驗(yàn)部分：標(biāo)準(zhǔn)品和試劑獸藥標(biāo)準(zhǔn)品購自 Dr. Ehrenstorfer GmbH、WITEGA laboratorien Berlin-Adlershof GmbH、Toronto Research Chemicals (TRC) 或 AccuStandard, Inc。表 1 列出了該溶液中含有的 151 種化合物。在流動(dòng)相配制中使用超純水（> 18.2 MΩ，Milli-Q 水系統(tǒng)）、乙腈（LC-MS 級(jí)，F(xiàn)luka）和甲酸（98% 左右，質(zhì)譜用，F(xiàn)luka）。在樣品前處理中使用乙腈（HPLC 級(jí)，SigmaAldrich）、二甲基亞砜（DMSO，> 99.9%，Aldrich）、乙酸銨（≥ 98%，Sigma-Aldrich）和甲酸（98% 左右，HPLC 級(jí)， Fluka）。

圖 1 所示為實(shí)驗(yàn)獲得的阿苯達(dá)唑、倍氯米松、氯霉素、四環(huán)素、竹桃霉素、依諾沙星、磺胺氯噠嗪和克侖特羅八個(gè)不同化學(xué)類別的八種化合物的校準(zhǔn)曲線。

Ultivo 表現(xiàn)出*的分析靈敏度。多數(shù)化合物都可以在基質(zhì)加標(biāo)濃度為 2 ng/g 的條件下檢出。例如，雞蛋樣品中有 93% 的化合物能夠以信噪比 (S/N) 大于 10 的水平檢出，對(duì)定性離子和定量離子均是如此。圖 2 是加標(biāo)濃度為 2 ng/g 的雞蛋樣品的樣品色譜圖。

圖 3 所示為不同基質(zhì)濃度條件下定性離子和定量離子 S/N > 10 的化合物所占的比例。

方法精度通過七次重復(fù)測(cè)定對(duì)方法在加標(biāo)濃度 5 ng/g 條件下的重現(xiàn)性進(jìn)行研究。圖 4 所示為豬肉和雞蛋樣品加標(biāo)濃度為 5 µg/kg 時(shí)分布比例的 %RSD (n = 7)。結(jié)果表明 %RSD 小于 20% 的化合物占 92%，重現(xiàn)性良好。

結(jié)論：本研究開發(fā)了一種能夠分析豬肉和雞蛋中 27 個(gè)類別的 151 種獸藥的便捷分析方法。分析靈敏度、準(zhǔn)確度和精度結(jié)果證明，Agilent Ultivo 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用是獸藥分析的可行解決方案。