用Q Exactive高分辨質(zhì)譜檢測血清中類胰島素生長因子
利用高分辨一級質(zhì)量信息進(jìn)行定量和定性,只考察了10ng/mL作為LLOQ的定量穩(wěn)定性,很好的達(dá)到了臨床實驗室的要求。用Vanquish結(jié)合Q Exactive高分辨質(zhì)譜檢測血清中類胰島素生長因子的方案提供了杰出的生物兼容性,不僅獲得了良好的色譜峰型,也使得殘留降到低。
圖1 類胰島素生長因子定量,定性和內(nèi)標(biāo)離子的色譜質(zhì)譜圖
圖2 在線固相萃取液相系統(tǒng)儀器配制
類胰島素生長因子(insulin-like growth factor 1, IGF1)在臨床上是一個非常重要的肽段類激素,通常用于評估由于生長激素的紊亂所導(dǎo)致的青少年生長發(fā)育的異常。目前國內(nèi)類胰島素生長因子1的檢測方法主要為免疫法,但采用免疫法檢測類胰島素生長因子1已經(jīng)被長期的臨床實踐證明存在許多的不足。然而,基于質(zhì)譜的臨床檢測方法已經(jīng)被越來越多的醫(yī)院檢驗科和臨床實驗室所追捧,因為質(zhì)譜法有出色的靈敏度,特異性和穩(wěn)定性。該方案我們就利用了Orbitrap超高分辨質(zhì)譜結(jié)合實驗室常見的超高壓液相系統(tǒng)來進(jìn)行類胰島素生長因子1的檢測。
結(jié)論
該方案建立了一種基于Vanquish超液相色譜和QE Focus超高分辨質(zhì)譜在血清中檢測類胰島素生長因子的方法。該方法采用兩步蛋白沉淀和在線固相萃取的方法來實現(xiàn)樣品的凈化,終獲得了滿足高通量臨床實驗室日常檢測的結(jié)果。
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